Swe Soluzzjoni Trypsin-EDTA Rikombinanti Mingħajr Aħmar Fenol

Trypsin huwa serine hydrolase li jista 'jaqta' l-carboxyl terminus ta 'lysine u arginine fil-ktajjen polypeptide. Id-diġestjoni tat-tripsin jintużaw fl-estrazzjoni taċ-ċelluli tat-tessuti, fil-kultura, u fil-kultura taċ-ċelluli in vitro biex jiġu idrolizzati proteini interċellulari u jiddissoċjaw tessuti jew ċelloli f'ċelloli individwali. Tripsin konvenzjonali jinkiseb mill-frixa ta 'annimali bħall-ħnieżer u l-baqar. L-oriġini tal-enzimi pankreatiċi konvenzjonali u l-karatteristiċi tal-proċess tal-produzzjoni jfissru li inevitabbilment fihom impuritajiet ta 'oriġini mill-annimali u kontaminazzjoni virali potenzjali. Dan il-prodott juża trypsin porċina rikombinanti biex jissostitwixxi trypsin konvenzjonali. L-ebda materja prima derivata mill-annimali ma tintuża fil-proċess tal-produzzjoni, u l-purità u l-vijabbiltà tat-tripsina porċina rikombinanti hija żgurata permezz ta 'rawnds multipli ta' purifikazzjoni. Dan jippermettilha li mhux biss tissostitwixxi l-funzjoni tat-tripsin konvenzjonali, iżda wkoll li tintuża għad-diġestjoni ta 'ċelluli jew tessuti speċjali fejn l-oriġini ħielsa mill-annimali hija strettament meħtieġa. Barra minn hekk il-prodott fih EDTA, l-ebda indikaturi aħmar tal-fenol.

Vapur bis-silġ imxarrab; Aħżen f'4 gradi 'l bogħod mid-dawl għal 12-il xahar. Jekk il-prodott ma jintużax għal żmien qasir, huwa rakkomandat li taħżen fi grad -20 għal żmien itwal.

Nota : Il-protokolli li ġejjin huma prinċipalment użati għal ċelloli aderenti. Għad-diġestjoni tat-tessuti, it-tessut jeħtieġ li jinqata 'f'daqsijiet xierqa l-ewwel. Il-ħin meħtieġ għad-diġestjoni jvarja ħafna minn tessut għal tessut, u ġeneralment ikun rakkomandabbli li t-tessuti jitkissru biżżejjed wara d-diġestjoni.

1. Neħħi l-mezz oriġinali tal-kultura taċ-ċelluli u aħsel iċ-ċelloli 1-2 darbiet b'PBS, medium mingħajr serum jew buffers oħra biex tneħħi s-serum residwu.

2. Żid l-ammont xieraq ta 'soluzzjoni ta' diġestjoni ta 'tripsin rikombinanti biex tkopri ċ-ċelloli u diġestiva taħt il-mikroskopju biex tosserva, il-biċċa l-kbira tal-ħin tad-diġestjoni taċ-ċelloli bejn 30s-3min; għal ċelluli indiġestibbli, jistgħu jitqiegħdu fl-inkubatur tal-kultura taċ-ċelluli biex jiddiġerixxu għal ċertu perjodu ta 'żmien (il-ħin tad-diġestjoni huwa għal referenza biss, il-ħin speċifiku tad-diġestjoni għandu jiġi determinat skont is-sitwazzjoni attwali).

3. Meta ċ-ċelluli juru tnaqqis sinifikanti jew bidliet morfoloġiċi, aspira d-diġest tat-tripsin rikostitwit u żid ammont xieraq ta 'mezz ta' kultura taċ-ċelluli li jkun fih serum biex ttemm id-diġestjoni (jekk iċ-ċelluli huma diffiċli biex jinqalgħu mill-qiegħ tal-pjanċa meta minfuħa bil-mod b' pipetta jew, dan jindika li l-ħin tad-diġestjoni mhuwiex biżżejjed u d-diġestjoni tista 'tibda mill-ġdid billi żżid iċ-ċellula tat-tripsina diġest.Evita diġestjoni żejda).

4. Iġbor is-sospensjoni taċ-ċelluli f'tubu ċentrifugu, ċentrifuga f'800-1200 rpm/min għal 3-5 min, żid ammont xieraq ta' medium tal-kultura taċ-ċelluli li jkun fih is-serum (mhux obbligatorju).

5. Blow ċelluli bil-mod biex tagħmel sospensjoni taċ-ċelluli, li tista 'tintuża għal passaġġ jew esperimenti sussegwenti.

1. Dan il-prodott jista 'jintuża direttament għad-diġestjoni taċ-ċelluli f'4 gradi. It-temperatura tad-diġestjoni tista 'tintgħażel f'temperatura tal-kamra jew f'inkubatur kif meħtieġ, iżda jekk jogħġbok saħħanx il-prodott direttament f'37 grad. Iż-żieda u l-waqgħa ripetuta tat-temperatura għandha ċertu effett fuq l-attività tal-enzima.

2. Wara li jirċievi l-prodott jista 'jinħażen f'porzjonijiet kif meħtieġ; jekk għandek bżonn taħżen fil--20 grad, evita l-iffriżar u t-tidwib ripetuti.

3. Il-ħin tad-diġestjoni jvarja bejn il-linji taċ-ċelluli jew it-tessuti, għalhekk jekk jogħġbok iċċekkja l-aħjar ħin tad-diġestjoni biex tevita diġestjoni eċċessiva għal żmien twil wisq, li jista 'jaffettwa l-attività u l-kundizzjoni taċ-ċelluli.

4. Dan il-prodott huwa asettiku u jinqara għall-użu, u ġie ttestjat għal mikoplasma u endotossina. Jekk jogħġbok agħti attenzjoni għall-operazzjoni asettika waqt l-użu.

5. Għall-fini tas-saħħa u s-sigurtà tiegħek, jekk jogħġbok ilbes il-kowt tal-laboratorju u l-ingwanti meta topera.

Għal Użu ta' Riċerka Biss!

It-tags Popolari: swe soluzzjoni rikombinanti trypsin-edta mingħajr fenol aħmar, Ċina swe soluzzjoni rikombinanti trypsin-edta mingħajr fenol aħmar manifatturi, fornituri, fabbrika